如何驗(yàn)證自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：使用驗(yàn)證載玻片的益處

關(guān)鍵詞：自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、細(xì)胞計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片、ISO 20391 標(biāo)準(zhǔn)、細(xì)胞計(jì)數(shù)參考材料、細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)、LUNA 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀系列、細(xì)胞計(jì)數(shù)驗(yàn)證、細(xì)胞活力評(píng)估

1 引言

自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀因其能夠快速、精確地提供細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果而廣受歡迎。盡管有這些優(yōu)點(diǎn)，但驗(yàn)證其準(zhǔn)確性以確保可靠的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果至關(guān)重要。微球常被用于驗(yàn)證流式細(xì)胞儀和自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀等設(shè)備。但使用微球存在各種問題，促使了細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片的研發(fā)，用于驗(yàn)證點(diǎn)成LUNA™細(xì)胞計(jì)數(shù)儀系列。

在本文中，我們將探討細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，以及使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片來驗(yàn)證點(diǎn)成LUNA™細(xì)胞計(jì)數(shù)儀系列的優(yōu)勢(shì)。

2 國(guó)際細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)

ISO 20391 標(biāo)準(zhǔn)的制定是為了為準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)提供指導(dǎo)，并確保細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的可靠性。該標(biāo)準(zhǔn)概述了一種通過系列稀釋實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)量質(zhì)量的方案，當(dāng)沒有參考材料時(shí)可以使用該方案。然而這個(gè)過程可能既耗時(shí)又復(fù)雜，需要進(jìn)行復(fù)雜的計(jì)算來確定決定系數(shù)和比例系數(shù)。

為了克服這一挑戰(zhàn)，建議使用參考材料以確保測(cè)量的可追溯性、便于進(jìn)行比較并驗(yàn)證測(cè)量過程。有效的方法是將平均分析結(jié)果與從有證參考材料中獲得的參考值進(jìn)行比較，從而無需進(jìn)行復(fù)雜的計(jì)算。盡管如此，選擇合適的參考材料仍然面臨挑戰(zhàn)。

3 使用驗(yàn)證微球作為參考材料的挑戰(zhàn)

驗(yàn)證微球，如美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院（NIST）微球，常被用作涉及粒徑和計(jì)數(shù)的各種分析方法中的參考材料。這些微球具有已知的大小和濃度，常被用作流式細(xì)胞術(shù)、顯微鏡檢查和其他類似技術(shù)的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。但是NIST 微球沒有熒光形式，不適合測(cè)試細(xì)胞活力。

雖然商用熒光微球可以作為替代，但移液過程中的誤差以及長(zhǎng)期儲(chǔ)存期間的蒸發(fā)可能會(huì)影響其準(zhǔn)確性，這需要小心處理和反復(fù)測(cè)試。因此目前沒有可用于細(xì)胞活力評(píng)估的商用參考材料。

選擇自行在內(nèi)部制備參考材料的用戶將不得不依賴手動(dòng)計(jì)數(shù)，手動(dòng)計(jì)數(shù)相對(duì)不精確，并且需要大量的樣本。或者可以使用流式細(xì)胞術(shù)，盡管獲得計(jì)數(shù)結(jié)果可能具有挑戰(zhàn)性，這種方法不太方便用戶操作。因此需要找到一種替代的細(xì)胞活力評(píng)估方法。

4 使用驗(yàn)證載玻片作為參考材料

使用具有穩(wěn)定性和一致性的參考材料對(duì)于確保細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確結(jié)果至關(guān)重要。一種能夠提供這種質(zhì)量控制水平的選擇是使用驗(yàn)證載玻片。這些載玻片包含預(yù)先點(diǎn)樣的圖案或預(yù)先固定的熒光微球，上面有已知數(shù)量的物體，消除了諸如因樣本加載導(dǎo)致的濃度變化、儲(chǔ)存期間的蒸發(fā)或分布不均等問題。

此外，驗(yàn)證載玻片允許使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的明場(chǎng)和熒光光學(xué)系統(tǒng)來驗(yàn)證總細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力。與其他設(shè)備進(jìn)行交叉驗(yàn)證也很簡(jiǎn)單，并且其穩(wěn)定性確保即使長(zhǎng)期儲(chǔ)存或反復(fù)使用，測(cè)量值也能保持一致。通過使用驗(yàn)證載玻片，研究人員可以節(jié)省原本用于進(jìn)行額外實(shí)驗(yàn)以確保準(zhǔn)確性的時(shí)間和資源。

（A）       細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片 —— 明場(chǎng) II 型 （B）細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片 —— 熒光型

5 如何使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片評(píng)估準(zhǔn)確性

細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片方案通過提供一種簡(jiǎn)單而高效的替代微球的方法，簡(jiǎn)化并改進(jìn)了驗(yàn)證細(xì)胞計(jì)數(shù)儀準(zhǔn)確性的過程。這種方法節(jié)省了時(shí)間，并提供了一種簡(jiǎn)便的方法來驗(yàn)證細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

要使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片方案，請(qǐng)按照以下簡(jiǎn)單步驟操作：

1)       檢查細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證載玻片標(biāo)簽上的細(xì)胞濃度和細(xì)胞活力值。

2)       將載玻片插入細(xì)胞計(jì)數(shù)設(shè)備中。

3)       使用 “IQOQ" 方案開始計(jì)數(shù)。

4)       記錄總細(xì)胞濃度和細(xì)胞活力值。

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